單光束分光光度計

　　最簡單的紫外可見分光光度計為單光束光學系統，來自單色器的光穿過樣品后到達檢測器。這種簡單的設計意味著所用的光學部件較少，可減小儀器尺寸并降低成本。

　　不過，在正式測量樣品前必須測量基線或空白樣品。在液體樣品測量中，基線讀數代表樣品池和所用溶劑的吸光度。使用單光束系統時，基線和樣品需要分開單獨測量。這意味著，如果兩次測量之間光強度或系統光學性能發生任何變化，就會影響到測量的準確性。對于耗時較長或空白易隨時間發生變化的樣品測量來說，準確性是一大問題。實際上這也意味著使用單光束系統進行測量時，在測量過程中應經常進行基線/空白測量。

雙光束分光光度計

　　很多分光光度計使用雙光束光學配置，來自單色器的光被分為兩束：參比光束和樣品光束。通常使用光學元件(如具有鏡面的旋轉輪或者稱為分束器的半鍍銀鏡)進行分光。每束光均通過獨立光路進入樣品室。由于擁有兩束相同波長的光，因此可以同時測量參比/空白和樣品。這意味著樣品測量可以實時校正任何儀器波動。這種實時校正可確保高度準確的測量結果。

　　具有兩個檢測器的雙光束光學系統示意圖